一张图谱，一次误判，实验重来——空白出峰到底是谁在捣鬼？

在高效液相色谱（HPLC）或液质联用（LCMS）分析中，你是否也曾遇到这样的困扰：明明进的是空白样品，却出现了不应该存在的色谱峰？

双酚A检测时，空白出峰

这些“幽灵峰”不仅干扰定性判断，还会导致定量结果偏差，甚至让整个实验推倒重来。别急，系统化的排查从清晰分类开始。

一、空白出峰，问题出在哪？

空白出峰的来源复杂，可能隐藏于实验的各个环节。在没有明确分类的情况下盲目排查，往往事倍功半。因此，第一步必须明确你面对的是哪一种“空白”。根据污染来源的不同，小蝌蚪黄色网站通常将空白分为四类:

1. 溶剂空白

仅使用流动相或相应纯溶剂，经样品瓶和进样针进样。用于排除样品基质本身的影响。

2. 系统空白（空针）

不进样，仅启动泵和检测器，让流动相走完全部分析流程。用于排查仪器流路、色谱柱或检测器本身是否存在污染或残留。

3. 样品瓶与进样针空白

用纯溶剂充分冲洗样品瓶和进样针后，装入该溶剂进样分析。专门用于判断污染是否来自进样容器或进样工具。

4. 前处理空白

模拟完整的样品前处理步骤（如提取、净化、浓缩），但不加入实际样品。用于锁定污染是否源自前处理试剂、耗材或操作过程。

二、记录峰特征，捕捉“幽灵”线索

确定空白类型后，不要急于冲洗或更换部件。详细记录异常峰的特征，能为后续溯源提供关键线索：

关键参数：

- 保留时间（Rt）： 是否与目标化合物一致？

- 峰面积/峰高： 判断污染程度。

- 峰形： 对称、拖尾还是前沿？是否与目标峰共流出？

- 重现性： 连续进样是否稳定出现？

特殊特征（针对不同检测器）：

- LCMS： 记录质荷比（m/z）和碎片离子，区分背景噪音与真实污染物。

- DAD： 查看紫外光谱图，判断是溶剂吸收峰还是杂质峰。

总结：精准定位是成功的一半

面对空白出峰，冷静分类，详细记录是高效解决问题的起点。明确污染来自系统内部还是外部，能将排查范围缩小一半，避免在错误的方向上浪费宝贵时间。